A、先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化，A正确；B、先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化，B正确；C、生长素与细胞分裂素用量比值低，有利于芽的分化，抑制根的形成，C正确；D、植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素，被称为“激素杠杆”．不使用植物激素，就不能形成愈伤组织，D错误．故选：D．
